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DC2.4 小鼠樹突狀細(xì)胞
更新時(shí)間:2018-08-13 點(diǎn)擊量:1931

細(xì)胞信息表

細(xì)胞名稱

DC2.4 小鼠樹突狀細(xì)胞

種屬

小鼠

形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基類型:1640培養(yǎng)基

FBS: 10%

抗生素:雙抗

培養(yǎng)條件:37℃,CO2: 5%

傳代方法

收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài):

如果沒長(zhǎng)滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。

如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁細(xì)胞傳代方法:

1 棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

2 加1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

懸浮細(xì)胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。

1 直接傳代是讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

2離心法傳代將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi), 1000rpm,5分鐘,去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后,分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

 一般沒有特殊說明,細(xì)胞一般是一傳二。

凍存方法

70% *培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

儲(chǔ)存:液氮中長(zhǎng)期保存。

1 觀察細(xì)胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。

2 在運(yùn)輸過程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

3 收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等,請(qǐng)?jiān)?/span>3天內(nèi)與我們聯(lián)系。

 

                            293T細(xì)胞培養(yǎng)說明書

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