一个人在线观看视频的免费,国产精品VIDEOSSEX久久,少妇精品揄拍高潮少妇,欧美AV在线观看

網(wǎng)站首頁技術中心 > 線粒體復合體Ⅱ試劑盒說明書 微量法
產(chǎn)品目錄
線粒體復合體Ⅱ試劑盒說明書 微量法
更新時間:2019-11-21 點擊量:1919

貨號:YJ1347                                                   規(guī)格:100管/96樣

線粒體復合體Ⅱ試劑盒說明書

微量法

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

線粒體復合體Ⅱ又稱琥珀酸-輔酶Q還原酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體中,催化琥珀酸氧化生成延胡索酸,同時輔基FAD還原為FADH2,后者進一步還原氧化型輔酶Q生成還原型輔酶Q,是呼吸電子傳遞鏈的支路。

測定原理:

復合體Ⅱ的催化產(chǎn)物還原型輔酶Q可進一步還原2,6-二氯吲哚酚,2,6-二氯吲哚酚在605nm有特征吸收峰,通過檢測2,6-二氯吲哚酚的減少速率來計算該酶活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體 100mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 20mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑三:液體 1.5mL×1 支,-20℃保存;

試劑四:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;

試劑五:粉劑×1 支,-20℃保存;

試劑六:液體 2.5mL×1 瓶,4℃保存;

樣本的前處理:

組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:

1、準確稱取0.1g組織或收集500萬細胞,加入1mL試劑一和10uL試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

2、將勻漿 600g,4℃離心5min。

3、棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。

4、上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測定從線粒體泄漏的復合體Ⅱ(此步可選做)。

5、步驟④中的沉淀即為線粒體,加入200uL試劑二和2uL試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10秒,重復30次),用于復合體Ⅱ酶活性測定。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至605nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定

(1)工作液的配制:臨用前把試劑五轉(zhuǎn)移到試劑四中混合溶解,置于37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)孵育5min;用不完的試劑4℃可保存一周;

(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本、25μL試劑六和200μL工作液,立即混勻,記錄605nm處初始吸光值A1和2min后的吸光值A2,計算ΔA=A1-A2。

 

復合體Ⅱ活力單位的計算:

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下:

(1) 按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1nmol 2,6-二氯吲哚酚定義為一個酶活力單位。復合體Ⅱ活力(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=559×ΔA÷Cpr

此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。

(2) 按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1nmol 2,6-二氯吲哚酚定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅱ活力(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T=113×ΔA÷W

(3) 按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1nmol 2,6-二氯吲哚酚定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅱ活力(nmol/min/104cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.226×ΔA

V 反總:反應體系總體積,2.35×10 -4 L;ε:2,6-二氯吲哚酚摩爾消光系數(shù),2.1×104 L/ mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 mL;V 樣總:加入提取液體積,0.202 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細胞或細菌總數(shù),500 萬。

b.使用96孔板測定的計算公式如下:

(1) 按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1nmol 2,6-二氯吲哚酚定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅱ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V樣) ÷T=1118×ΔA÷Cpr

此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。

(2) 按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1nmol 2,6-二氯吲哚酚定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅱ活力(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W×V樣÷V樣總)÷T=226×ΔA÷W

(3) 按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1nmol 2,6-二氯吲哚酚定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅱ活力(nmol/min/104cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.452×ΔA

V 反總:反應體系總體積,2.35×10 -4 L;ε:2,6-二氯吲哚酚摩爾消光系數(shù),2.1×10 4 L/ mol /cm;d:96 孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 mL;V 樣總:加入提取液體積,0.202mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細胞或細菌總數(shù),500 萬。

總抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)試劑盒說明書(微量法)

AxyPrep 無內(nèi)毒素質(zhì)粒大量試劑盒

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

亚洲精品国产精品国自产| 欧美特黄A级高清免费大片A片| 精品少妇ay一区二区三区| 无码精品人妻一区二区三区AV| 亚洲欧美中文日韩v在线| 天堂VA蜜桃一区二区三区| 国产亚洲精品拍拍拍拍拍| 无码人妻精品一区二区三区9厂| 蜜臀AV999无码精品国产专区| 欧美IPHONEXSMAX免费| 亚洲色偷无码一区二区蜜桃AV| 初爱视频教程免费看| 亚洲精品成人无码区一在线观看| 国产黄在线观看免费观看不卡| 给我免费播放片在线| 久久精品国产99久久久香蕉| 大学生疯狂高潮呻吟免费视频| 国产一区二区三区乱码| 天美传媒mv在线看免费下载安装| 高清播放器欧美大片| 蜜桃成人免费视频在线播放| 国产成人精品免费视频大全| 国际精品鲁一鲁一区二区| 欧美videosfree性派对| 国产免费av在线观看| 国产精品久久久久久婷婷 | 久久夜色精品国产| 日韩黄色网站| 亚洲AV无码偷拍在线观看| 国产精品视频第一区二区三区| 漂亮人妻被强了bd影片| 亚洲国产精品久久久久爰色欲| 亚洲va欧美va天堂v国产综合 | 国产精品久久欧美久久一区| 日韩精品视频一区二区三区| 亚洲 欧美 国产 日韩 精品| 无码国内精品人妻少妇蜜桃视频| 黄金网站免费下载安装| 国产精品久久久久久久免费a片| 国产成人免费ā片在线观看| 欧美私人家庭影院|